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產(chǎn)品概述
白細(xì)胞介素12(IL-12)和白細(xì)胞介素23(IL-23)是分泌型的異二聚體糖蛋白，其屬于IL-12細(xì)胞因子家族。這兩種細(xì)胞因子擁有相同的p40亞基，他們以二硫鍵分別和IL-12上的p35亞基、IL-23上的p19亞基相連。P40除了作為IL-12和IL-23的組成成分外，游離的P40二聚體和單體也是存在的。哺乳動(dòng)物中表達(dá)p40的細(xì)胞包括巨噬細(xì)胞、樹突細(xì)胞、單核細(xì)胞、漢斯細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、角質(zhì)形成細(xì)胞、漿細(xì)胞樣樹突狀細(xì)胞和小膠質(zhì)細(xì)胞。在共同表達(dá)p40和表達(dá)具有特異性p35亞基的IL-12細(xì)胞中，游離p40的量比異源二聚體IL-12的量高達(dá)10-1000倍。IL-12和IL-23是重要的免疫調(diào)節(jié)分子，在促進(jìn)細(xì)胞介導(dǎo)的免疫中他們具有重疊但是又不同的生物學(xué)功能。
產(chǎn)品原理
本實(shí)驗(yàn)采用雙抗體夾心ELISA法?？剐∈驣L-12p40單抗包被于酶標(biāo)板上，標(biāo)本和標(biāo)準(zhǔn)品中的IL-12p40會(huì)與單抗結(jié)合形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去；加入生物素化的抗小鼠IL-12p40抗體，生物素化抗小鼠IL-12p40抗體與酶標(biāo)板上結(jié)合的標(biāo)準(zhǔn)品或樣本中的小鼠IL-12p40結(jié)合而形成免疫復(fù)合物，游離的成分被洗去；加入辣根過氧化物酶標(biāo)記的親合素，親合素與生物素特異性結(jié)合，游離的成分被洗去。加入顯色底物（顯色劑），若反應(yīng)孔中有IL-12p40，辣根過氧化物酶會(huì)使無色的顯色劑變藍(lán)，加終止液變黃。在450nm處測OD值，IL-12p40濃度與OD450值之間呈正相關(guān)，可通過繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線求出標(biāo)本中IL-12p40濃度。